近期，佛山市第一人民医院病理科刘芳/何枚瑶团队在《Scientific Reports》发表了题为“Spatial transcriptomics reveals tumor microenvironment heterogeneity in EBV positive diffuse large B cell lymphoma”的研究论文。

EB病毒阳性弥漫大B细胞淋巴瘤，非特指型（EBV+ DLBCL，NOS），是一种侵袭性高的B细胞源性非霍奇金淋巴瘤，其治疗反应差、复发率高，预后总体较差。该研究首次利用空间转录组技术比较EBV阳性DLBCL与EBV阴性DLBCL两种不同淋巴瘤的空间空间细胞类型构成及其布局差异，深入探索EBV+ DLBCL的免疫微环境，希望为临床治疗EBV+DLBCL提供重要的科学理论基础，实现个性化精准治疗。

本团队利用10X Visium空间转录组学与单细胞RNA测序结合，绘制了EBV+ DLBCL中的肿瘤微环境（TME）异质性。通过生信分析及体外实验验证，PD-1/PD-L1信号通路可以抑制EBV+ DLBCL细胞系Farage的增殖，促进凋亡，且TLR4作为下游效应因子呈现出EBV状态依赖性的调控作用（图1）。TLR4作为潜在的治疗反应介导因子，为个性化治疗提供了理论依据。

作者使用Scanpy对所有样本的空间转录组学数据进行整合聚类、对比“类大容量”（pseudo-bulk）表达数据，发现两者之间具有高度的异质性（图1），表明EBV感染显著影响了DLBCL组织中的空间细胞类型构成及其分布格局。

图1. EBV+ DLBCL 和 EBV- DLBCL 空间异质性的不同模式

为深入理解不同细胞类型在组织中的分布及其空间组织结构，作者通过细胞映射、并对每个肿瘤细胞亚群进行差异表达基因分析/功能富集分析/肿瘤的疫微环境的状态分析，结果显示EBV⁺ DLBCL中肿瘤组织的免疫激活与免疫抑制通路均比EBV⁻ DLBCL更为显著。提示EBV⁺ DLBCL患者更易出现免疫监视缺失，表现为显著的负向免疫调控状态，可能与EBV介导的免疫逃逸密切相关。

针对EBV⁺ DLBCL与EBV⁻ DLBCL肿瘤区域的差异基因，检测并原位验证PD-1/PD-L1信号通路存在显著空间差异（图2A-D）。在EBV⁺ DLBCL中，PD-1/PD-L1信号主要由单核细胞/巨噬细胞介导，而在EBV⁻ DLBCL中则主要由滤泡辅助性T细胞介导（图2E-H）。EBV可通过不同免疫细胞类型对PD-1/PD-L1轴的调控作用，造成DLBCL中该信号通路的差异性。

图2. 免疫检查点分子 PD-1/PD-L1在 EBV+ DLBCL 和 EBV- DLBCL 的免疫微环境中的空间表达模式

最后作者也通过体外实验再次验证PD-1/PD-L1轴在EBV+DLBCL中的关键作用，同时发现新的关键下游基因TLR4（图3），这对未来靶向治疗，实现更加精准和个体化的治疗策略提供理论基础。

图3. 评估 EBV 感染下 PD-1/PD-L1 信号对 DLBCL 细胞的影响

（文章链接：https://www.nature.com/articles/s41598-025-00410-x）

供稿：病理科刘芳